Təbiət.com ziyarət etdiyiniz üçün təşəkkür edirəm. İstifadə etdiyiniz brauzer versiyası məhdud CSS dəstəyi var. Ən yaxşı nəticələr üçün daha yeni bir brauzerdən (və ya Internet Explorer-də uyğunluq rejimini söndürmək) tövsiyə edirik. Bu vaxt, davamlı dəstəyi təmin etmək üçün saytın üslub və JavaScript olmadan göstərəcəyik.
Modika dəyişikliyinin (MC) heyvan modellərinin yaradılması MC-ni öyrənmək üçün vacib bir əsasdır. Əlli dörd Yeni Zelandiya ağ dovşanlar, Şam-Əməliyyat qrupuna, əzələ implantasiya qrupuna (ME GROUP) və NUCLEUS Pulposus İmplantasiya Qrupuna (NPE Group) bölündü. NPE qrupunda intervertebral disk anterolateral lomber cərrahi yanaşma məruz qaldı və bir iynə son boşqabın yaxınlığında L5 vertebral gövdəni ponksiyonlaşdırmaq üçün istifadə edilmişdir. NP, bir şpris tərəfindən L1 / 2 Intervertebral diskdən çıxarıldı və ona girildi. Subchondral sümüyündə bir çuxur qazmaq. Əzələ implantasiya qrupundakı cərrahi prosedurlar və qazma metodları və Şam-Əməliyyat qrupu NP implantasiya qrupundakılarla eyni idi. Məndə olan qrupda, bir əzələ bir parçası çuxura qoyuldu, utanc qrupu içərisində isə çuxura heç bir şey qoyulmadı. Əməliyyatdan sonra MHİ tarama və molekulyar bioloji test edildi. NPE qrupundakı siqnal dəyişdi, ancaq Şam-Əməliyyat Qrupunda və ME qrupunda açıq bir siqnal dəyişikliyi yox idi. Histoloji müşahidə göstərdi ki, implantasiya saytında anormal toxuma yayılması və İM-4, IL-17 və İzn-γ İzn-γ ifadəsi artdı. NP-nin subchondral sümüyünə implantasiyası MC-nin heyvan modeli təşkil edə bilər.
Modik dəyişikliklər (mc), maqnit rezonans görüntüsü (MHİ) görünən vertebral bütövlüklərin və bitişik sümük iliyinin lezyonlarıdır. Associated simptomları olan şəxslərdə olduqca yaygındırlar. Bir çox tədqiqat, bel ağrısı (LBP) 2,3 ilə birləşməsi səbəbindən MC-nin əhəmiyyətini vurğuladı. De Roos et al.4 və Modic et al.5 müstəqil olaraq əvvəlcə üç fərqli subchondral siqnal anormallıqlarını vertebral sümük iliyində təsvir etdi. Modik tipli i Dəyişikliklər T2 ölçülü (T2W) ardıcıllıqlarında T1 ölçülü (T1W) ardıcıllığı və hiperintensiyasında hipintense. Bu lezyon, sümük iliyindəki qırıq endplatları və qonşu damar qranulyasiya toxumasını ortaya qoyur. Modik tipli II dəyişikliklər həm T1W, həm də T2W ardıcıllığında yüksək siqnal göstərir. Bu tip lezyonda, məhv edilmək, habelə qonşu sümük iliyinin histoloji yağ dəyişdirilməsi ilə yanaşı tapıla bilər. Modik tipli III dəyişikliklər T1W və T2W ardıcıllığında aşağı siqnal göstərir. Döngələrə uyğun sklerotik lezyonlar müşahidə edilmişdir6. MC onurğanın patoloji xəstəliyi hesab olunur və belinin bir çox degenerativ xəstəlikləri ilə yaxından əlaqəlidir7,8,9.
Mövcud məlumatları nəzərə alaraq, bir neçə tədqiqat, MC-nin etiologiyası və patoloji mexanizmləri ilə bağlı ətraflı məlumat vermişdir. Albert et al. MC-nin disk yırtığı8 səbəb ola biləcəyini təklif etdi. Hu et al. MC-ni ağır disk degenerasiyası ilə əlaqələndirdi10. KROC, təkrarlanan disk travmasının sonda mikroiğinə səbəb ola biləcəyini söyləyən "Daxili disk yırtığı" anlayışını təklif etdi. Yarıq yaranandan sonra, nüvə pulposusu (NP) tərəfindən məhv edilməsi, MC11-in inkişafına səbəb olan otoimmün cavabı səbəb ola bilər. Ma et al. Bənzər bir mənzərəni bölüşdü və NP-in hazırladığı otoimmunity MC12-nin patogenezində əsas rol oynadığını bildirdi.
İmmunitet sistemi hüceyrələri, xüsusən CD4 + T köməkçi limfositlər, otoimmunity13 patogenezində kritik rol oynayır. Bu yaxınlarda kəşf edilmiş TH17 Subet, proinflamatik Cytokine IL-17, ChemoKine ifadəsini təşviq edir və zədələnmiş orqanlarda t hüceyrələri iFn-γ14 istehsal etmək üçün stimullaşdırır. TH2 hüceyrələri də immun cavablarının patogenezində özünəməxsus rol oynayır. İL-4-nin nümayəndəsi olaraq İL-4-in ifadəsi, şiddətli immunopatoloji nəticələrə səbəb ola bilər15.
Bir çox klinik tədqiqat MC16,17,18,19,19,21,22,24 4-də aparılsa da, hələ də insanlarda tez-tez baş verən və ola biləcək MC prosesini təqlid edə biləcək uyğun heyvan eksperimental modellərinin olmaması var yönəldilmiş terapiya kimi etiologiyanı və ya yeni müalicələri araşdırmaq üçün istifadə olunur. Bu günə qədər, əsas patoloji mexanizmləri öyrənmək üçün MC-nin yalnız bir neçə heyvan modeli bildirildi.
Albert və MA-nın təklif etdiyi otoimmün nəzəriyyəsinə əsasən, bu araşdırma, qazılmış vertebral uclu boşqabın yaxınlığında, Autotransplanting mc modelini qurdu. Digər məqsədlər heyvan modellərinin histoloji xüsusiyyətlərini müşahidə etmək və MC-nin inkişafında NP-nin xüsusi mexanizmlərini qiymətləndirməkdir. Bu məqsədlə MK-nın inkişafını öyrənmək üçün molekulyar biologiya, MHİ və histoloji tədqiqatlar kimi texnikalardan istifadə edirik.
Əməliyyat zamanı iki dovşan öldü və MHİ dövründə anesteziya zamanı dörd dovşan öldü. Qalan 48 dovşan sağ qaldı və əməliyyatdan sonra davranış və ya nevroloji əlamətlər göstərmədi.
MHİ göstərir ki, müxtəlif çuxurlarda quraşdırılmış toxumanın siqnal intensivliyi fərqlidir. NPE qrupundakı L5 vertebral orqanının siqnal intensivliyi tədricən 12, 16 və 20 həftə sonra dəyişdi (T1W ardıcıllığı aşağı siqnal və t2w ardıcıllığı göstərilmiş qarışıq siqnal və aşağı siqnal göstərdi) (Şəkil 1C) Digər iki qrupun eyni dövrdə (Şəkil 1, B) dövründə nisbətən sabit qaldı.
(A) 3 dəfə nöqtədə dovşan bel belinin təmsilçisi MRİ. Şam-Əməliyyat Qrupunun şəkillərində heç bir siqnal anormallıqları tapılmadı. (B) Məni Qrupdakı vertebral orqanın siqnal xüsusiyyətləri Şam-Əməliyyat qrupundakılara bənzəyir və zamanla yerləşdirilmiş saytda heç bir əhəmiyyətli siqnal dəyişikliyi müşahidə olunur. (C) NPE qrupunda, aşağı siqnal T1W ardıcıllığında aydın görünür və qarışıq siqnal və aşağı siqnal T2W ardıcıllığında aydın görünür. 12 həftəlik müddətdən 20 həftəlik müddətə qədər, T2W ardıcıllığında aşağı siqnalları əhatə edən sporadik yüksək siqnalları azalır.
Aydın sümük hiperplaziyası NPE qrupundakı vertebral bədənin implantasiya yerində görünə bilər və sümük hiperplaziyası NPE qrupu ilə müqayisədə 12-20 həftədəki (Şəkil 2c), modelləşdirilmiş vertebralda heç bir əhəmiyyətli dəyişiklik müşahidə olunur cəsədlər; Şam qrupu və mən qrupu (Şəkil 2c) 2a, b).
(A) İmplantasiya edilmiş hissədəki onurğalı bədənin səthi çox hamar, çuxur yaxşı sağaldır və vertebral bədəndə hiperplazi yoxdur. (B) Mən ME qrupundakı İmplantasiya edilmiş saytın forması, Şam Əməliyyat qrupunda buna bənzəyir və zamanla implantasiya edilmiş yerin görünüşündə açıq bir dəyişiklik yoxdur. (C) Sümük hiperplaziyası, NPE qrupundakı implantasiya edilmiş saytda meydana gəldi. Sümük hiperplaziyası sürətlə artdı və hətta intervertebral disk vasitəsilə kontrolderal vertebral bədənə qədər uzandı.
Histoloji analiz sümük meydana gəlməsi haqqında daha ətraflı məlumat verir. Şəkil 3 H & E ilə ləkələnmiş əməliyyatdan sonrakı hissələrin fotoşəkillərini göstərir. Şam-əməliyyat qrupunda xondrokitlər yaxşı qurulmuş və heç bir hüceyrə yayılması aşkar edilmədi (Şəkil 3A). Mən ME qrupundakı vəziyyət, Şam-Əməliyyat Qrupunda (Şəkil 3B) buna bənzəyirdi. Bununla birlikdə, NPE Qrupunda, implantasiya saytında (Şəkil 3c) -də çox sayda xondrokit və np bənzər hüceyrələrin yayılması müşahidə edilmişdir;
(A) Trabeculae son boşqabın yaxınlığında görünə bilər, xondrokitlər səliqəli şəkildə vahid hüceyrə ölçüsü və forması və heç bir yayılma (40 dəfə) ilə düzəldilmişdir. (B) Məni Qrupdakı İmplantasiya Saytının vəziyyəti Şam Qrupuna bənzəyir. Trabeculae və xondrokitlər görünə bilər, ancaq implantasiya saytında açıq bir yayılma yoxdur (40 dəfə). (B) Xondrositlər və NP-nin bənzər hüceyrələrinin əhəmiyyətli dərəcədə yayıldığı və xondrokitlərin forması və ölçüsü qeyri-bərabərdir (40 dəfə).
İnterleukin 4 (IL-4) MRNA, İnterleukin 17 (IL-17) MRNA və İnterferon γ (IFN-γ) MRNA, həm də ME qruplarında MRNA izlənildi. Hədəf genlərinin ifadə səviyyəsi müqayisə edildikdə, IL-4, IL-17, IL-17 və IFN-γ İPN-γ-də ME qrupu və Şam Əməliyyat Qrupu ilə müqayisədə (Şəkil 4) (P <0.05). Şam Əməliyyat Qrupu ilə müqayisədə IL-4, IL-4, IL-17 və IFN-γ -də IFN-γ IFN-γ-də yalnız bir qədər artdı və statistik dəyişikliyə (p> 0.05) çatmadı.
NPE Qrupunda IL-4, IL-4 və IFN-γ-nin MRNA ifadəsi, Şam Əməliyyat Qrupu və ME qrupundakı və ME qrupundakılardan daha yüksək bir tendensiya göstərdi (p <0.05).
Bunun əksinə olaraq, ME qrupundakı ifadə səviyyəsi heç bir əhəmiyyətli fərq göstərmədi (p> 0.05).
Dəyişdirilmiş MRNA ifadəsini təsdiqləmək üçün IL-4 və IL-17-ə qarşı ticari olaraq mövcud antikorlardan istifadə edərək Qərb Blot təhlili aparıldı. Rəqəmlərdə göstərildiyi kimi, B qrupu və Şam Əməliyyat qrupu ilə müqayisədə, NPE Qrupunda IL-4 və IL-17-in Zülal Səviyyələri əhəmiyyətli dərəcədə artırıldı (p <0.05). Şam Əməliyyat Qrupu ilə müqayisədə IL-4 və IL-17-in Zülal Səviyyə Məni Qrupunda da statistik cəhətdən əhəmiyyətli dəyişikliklərə (p> 0.05) əldə edə bilmədi.
(A) NPE qrupundakı IL-4 və IL-17-nin protein səviyyəsi ME qrupundakı və Plasebo qrupundakılardan (p <0.05) -dən xeyli yüksək idi. (B) qərb blot histoqramı.
Əməliyyat zamanı alınan məhdud sayda insan nümunələri, MC-nin patogenezi ilə bağlı aydın və detallı tədqiqatlar bir qədər çətindir. Potensial patoloji mexanizmlərini öyrənmək üçün MC-nin heyvan modeli yaratmağa çalışdıq. Eyni zamanda, radioloji qiymətləndirmə, histoloji qiymətləndirmə və molekulyar bioloji qiymətləndirmə, NP Autograft tərəfindən induktoru olan MC-nin gedişatını izləmək üçün istifadə edilmişdir. Nəticədə, NP implantasiya modeli, siqnal intensivliyində 12 həftəlik 20 həftəlik vaxt nöqtələrindən (T1W ardıcıllığı və T2W ardıcıllığında qarışıq aşağı siqnalda, T2W ardıcıllığında qarışıq aşağı siqnal və aşağı siqnalda olan siqnal) tədricən dəyişməsi ilə nəticələndi Bioloji qiymətləndirmələr radioloji araşdırmanın nəticələrini təsdiqlədi.
Bu təcrübənin nəticələri göstərir ki, Vizual və histoloji dəyişikliklər NPE qrupunda vertebral bədən pozuntusunun yerində baş verib. Eyni zamanda, IL-4, IL-17 və IFn-17, eləcə də İL-4, IL-17 və IFN-γ genləri, eləcə də afr-17 və iFn-γ-nin ifadəsi, onuruşda otoloji nüvə pulposus toxumasının pozulmasının olduğunu ifadə edərək müşahidə edildi Bədən bir sıra siqnal və morfoloji dəyişikliklərə səbəb ola bilər. Heyvan modelinin vertebral gövdələrinin siqnal xüsusiyyətlərinin (T1W ardıcıllığında aşağı siqnal, qarışıq siqnal və aşağı siqnalın aşağı siqnalı) insan vertebral hüceyrələrinə və MHİ xüsusiyyətlərinə də bənzəyir Histologiya və ümumi anatomiya müşahidələrini təsdiqləyin, yəni onurğalı bədən hüceyrələrinindəki dəyişikliklər mütərəqqidir. Kəskin travma nəticəsində yaranan iltihablı cavab ponksiyondan sonra görünə bilər, MHİ nəticələri, ponksiyondan 12 həftə sonra 12 həftə sonra meydana gəldiyini və ya MHİ dəyişikliklərinin heç bir əlaməti olmadan 20 həftəyə qədər davam etdiyini göstərdi. Bu nəticələr, otoloji vertebral NP-nin dovşanlarda mütərəqqi MV-ni yaratmaq üçün etibarlı bir metod olduğunu göstərir.
Bu ponksiyon modeli adekvat bacarıq, vaxt və cərrahi səy tələb edir. Əvvəlcədən təcrübələr, paravertebral ligramentous strukturların parçalanması və ya həddindən artıq stimullaşdırılması vertebral osteoofitlərin meydana gəlməsi ilə nəticələnə bilər. Qonşu diskləri zərər verməmək və ya qıcıqlandırmaq üçün qayğı göstərilməlidir. Nüfuzun dərinliyi ardıcıl və təkrarlanan nəticələr əldə etmək üçün idarə olunmalıdır, 3 mm uzunluğundakı iynənin qabığını kəsərək əl ilə bir fiş hazırladıq. Bu fişdən istifadə, vertebral bədəndə vahid qazma dərinliyini təmin edir. İlkin təcrübələrdə, əməliyyatda iştirak edən üç ortopedik cərrah, 18 ölçülü iynələr və ya digər üsullarla işləmək üçün 16 ölçülü iynələr tapıldı. Qazma zamanı həddindən artıq qanaxmanın qarşısını almaq üçün iynəni hələ də tutmaq üçün bir müddət daha uyğun bir taxma çuxurunu təmin edəcək, müəyyən dərəcədə MC-nin bu şəkildə idarə olunacağını təklif edən daha uyğun bir taxma çuxurunu təmin edəcəkdir.
Bir çox tədqiqat MC-ni hədəf alsalar da, az mc25,26,27-in etiologiyası və patogenezi haqqında az məlumdur. Əvvəlki araşdırmalarımıza əsasən, o, otoimmunitetin MC12-nin meydana gəlməsində və inkişafında əsas rol oynadığını gördük. Bu araşdırma, IL-4, IL-17, IL-17 və antigen stimullaşdırıldıqdan sonra CD4 + hüceyrələrinin əsas fərqləndirmə yolları olan IL-17 və IFN-γ-nin kəmiyyət ifadəsini araşdırdı. Tədqiqatımızda, mənfi qrupla müqayisədə, NPE Qrupu IL-4, IL-17 və IFN-γ və İL-4 və IL-17 protein səviyyəsi də daha yüksək idi.
Klinik olaraq, İL-17 MRNA MRNA İZLƏNMƏSİ, DISK Herniation28 olan xəstələrdən NP hüceyrələrində artır. IL-4 artdı və IFN-γ ifadələrinin səviyyəsi, sağlam idarəetmə ilə müqayisədə kəskin kompressiv disk yırtıcı modelində də tapıldı .29. IL-17 iltihabda əsas rol oynayır, otoimmün xəstəliklərindəki toxuma zədəsi30 və İmmun cavabını IFN-γ31-ə artırır. İnkişaf etmiş IL-17 vasitəçi toxuma zədəsi MRL / LPR MICE32 və otoImmunity-həssas Mice33-də bildirildi. IL-4 proinflamatator sitokinlərinin (məsələn, il-1β və TNFα) və makrofahiya aktivləşdirmə34 kimi ifadəsini maneə törədir. IL-4-nin MRNA ifadəsinin IL-17 və IFN-γ ilə müqayisədə NPE qrupunda fərqli olduğunu bildirdi; NPE qrupundakı MRNT-γ ifadəsi digər qruplarda bundan xeyli yüksək idi. Buna görə, IFN-γ istehsalı, NP interkalation tərəfindən intercalation səbəb olan iltihablı cavabın vasitəçisi ola bilər. Tədqiqatlar göstərir ki, ifn-γ bir çox hüceyrə növü, o cümlədən aktivləşdirilmiş tip 1 hüceyrə t hüceyrələri, təbii qatil hüceyrələri və makrofizasiyalar35,36, immun cavablarını təqdim edən əsas pro iltihablı sitokindir37.
Bu araşdırma, Autoimmün cavabının MC-nin meydana gəlməsi və inkişafında iştirak edə biləcəyini göstərir. Luoma et al. MC və görkəmli NP-nin siqnal xüsusiyyətlərinin MHİ-də oxşar olduğunu və hər ikisi T2W Sequence38-də yüksək siqnal göstərdiyini tapdı. Bəzi sitokinlər İL-139 kimi MC-nin meydana gəlməsi ilə sıx əlaqəli olduğu təsdiqləndi. Ma et al. NP-nin yuxarı və ya aşağı tərəfinin çıxışının MC12-nin meydana gəlməsinə və inkişafına böyük təsir göstərməsini təklif etdi. Bobechko40 və Herzbein et al.41, NP-nin doğuşdan damar dövriyyəsinə girə bilməyən immunotolerant bir toxuma olduğunu bildirdi. NP çıxıntıları xarici cisimləri qan tədarükünə təqdim edir və bununla da yerli otoimmün reaksiyaları vasitəçiliyi42. Otoimmün reaksiyaları çox sayda immun amillərini təmin edə bilər və bu amillər daim toxumalara məruz qaldıqda, siqnalda dəyişikliklərə səbəb ola bilər43. Bu araşdırmada IL-4, IL-17 və IFN-γ-nin həddindən artıq dərəcədə tipik immunitet amilləri, NP ilə MCS44 arasındakı yaxın əlaqəni daha da artırır. Bu heyvan modeli yaxşı bir plitə içərisinə girən və girişini yaxşı təqlid edir. Bu proses daha sonra otoimmunitetin MC-də təsirini ortaya qoydu.
Gözlənildiyi kimi, bu heyvan modeli bizə MC öyrənmək üçün mümkün bir platforma təqdim edir. Bununla birlikdə, bu model hələ də bəzi məhdudiyyətlərə malikdir İkincisi, bu işdə üç dəfə üç dəfə nəzərə alınsa da, təəssüf ki, yalnız bir növ MC (dəyişdiyim modik tipli model) modelləşdirdik, buna görə insan xəstəliyinin inkişafı prosesini təmsil etmək kifayət deyil və daha çox vaxt nöqtələri təyin etmək lazımdır Bütün siqnal dəyişikliklərini daha yaxşı müşahidə edin. Üçüncüsü, toxuma quruluşundakı dəyişikliklər həqiqətən histoloji boyanma ilə aydın şəkildə göstərilə bilər, lakin bəzi ixtisaslaşdırılmış texnikalar bu modeldəki mikrontruktur dəyişiklikləri daha yaxşı aşkar edə bilər. Məsələn, qütblü yüngül mikroskopiya dovşan intervertebral disklərdə fibrocartilage formalaşmasını təhlil etmək üçün istifadə edilmişdir45. MC-də NP-nin uzunmüddətli təsiri və endplate əlavə təhsil tələb edir.
Əlli dörd kişi Yeni Zelandiya ağ dovşanlar (Ağırlıq təxminən 2,5-3 kq, 3-3.5 aylıq) təsadüfi Şam Əməliyyat qrupu, Muscle implantasiyası qrupu (ME GROUP) və sinir kök implantasiya qrupuna bölündü (NPE Group). Bütün eksperimental prosedurlar Tianjin Xəstəxanasının Etika Komitəsi tərəfindən təsdiqləndi və eksperimental üsullar təsdiq edilmiş qaydalara uyğun olaraq ciddi şəkildə aparıldı.
S. Sobajima 46-ın cərrahi texnikasına bəzi irəliləyişlər edilmişdir. Hər dovşan yanal təkrarlama vəziyyətinə yerləşdirildi və ardıcıl beş lombar intervertebral disk (IVDS) bir posteroliateral retroperitoneal yanaşmadan istifadə edərək məruz qaldı. Hər dovşanın ümumi anesteziya verildi (20% uretan, qulaq damar vasitəsilə 5 ml / kq). Qabırğaların alt kənarından tutmuş pelvik brim, 2 sm panavertebral əzələlərə qədər olan uzununa bir dəri kəsik edildi. L1-dən L6-a qədər olan sağ anterolateral onurğa, həddindən artıq subkutan toxuma, retroperitoneal toxuma və əzələlərin kəskin və kəskin parçalanması ilə ifşa edildi. Disk səviyyəsi, Pelvic Brim-dən L5-L6 disk səviyyəsi üçün anatomik bir əlamət olaraq istifadə edərək müəyyən edilmişdir. L5 vertebra'nın son boşqabının yaxınlığında 3 mm dərinliyə (Şəkil 6B) bir deşik qazmaq üçün 16 ölçülü bir ponksiyon istifadə edin. L1-L2 Intervertebral Disc (Şəkil 6c) -də autoloji nüvə pulposusunu istəmək üçün 5 ml şprisdən istifadə edin. Hər qrupun tələblərinə uyğun olaraq nüvəli pulposus və ya əzələ çıxarın. Qazma çuxuru dərinləşdikdən sonra, homsblbable tikişlər, səthi fasya və dəri, səthi fasya və dəri, əməliyyat zamanı vertebral bədənin periosteal toxumasına zərər verməməyə diqqət yetirir.
(A) L5-L6 diski posteroliateral retroperitoneal yanaşma ilə məruz qalır. (B) L5 endplate yaxınlığında bir çuxur qazmaq üçün 16 ölçülü bir iynə istifadə edin. (C) Otoloji MFS yığılır.
Ümumi anesteziya, qulaq damar vasitəsilə idarə olunan 20% uretan (5 ml / kq) ilə idarə edildi və bel onurğa rentgenoqrafiyası 12, 16 və 20 həftədən sonra 20 həftədə təkrarlandı.
Dovşanlar Ketaminin (25.0 mq / kq) intramüsküler inyeksiyası və intradaxili natrium pentobarbital (1.2 q / kq) əməliyyatdan sonra 12, 16 və 20 həftə sonra qurban kəsildi. Bütün onurğa histoloji analiz üçün çıxarıldı və real analiz edildi. İmmun amillərində dəyişiklikləri aşkar etmək üçün kəmiyyət tərs transkripsiyası (RT-qpcr) və Qərb ləkəsi istifadə edilmişdir.
MHİ imtahanları, bir ortogonal bir maqnit (ge tibbi sistemlər, florensiya, sc) istifadə edərək, ortogonal bir əzələ rulon qəbuledicisi ilə təchiz olunmuş dovşanlarda edildi. Dovşanlar 20% uretan (5 ml / kq) qulaq damarından (5 ml / kq) ilə anesteziya edildi və sonra maqnit içərisində 5 düymlük diametrli dairəvi səth coil (ge tibbi sistemlər) mərkəzində olan Lomber bölgəsi ilə supine yerləşdirildi. Coronal T2-ağırlaşdırılmış lokalizasiya şəkilləri (tr, 1445 ms; te, 37 ms) L3-L4-dən L5-L6-a qədər Lomber diskinin yerini müəyyənləşdirmək üçün əldə edildi. Sagittal təyyarəsi T2 ölçülü dilimlər aşağıdakı parametrlər ilə əldə edildi: 2200 ms, 2200 ms və echo vaxtı (TR) ilə 70 ms (te) ilə sürətli spin-əks-səadət ardıcıllığı; vizual sahə 260 və səkkiz stimul; Kəsmə qalınlığı 2 mm idi, boşluq 0,2 mm idi.
Son fotoşəkil çəkildikdən və son dovşan öldürüldükdən sonra, şam, əzələ quraşdırılmış və NP diskləri histoloji müayinə üçün çıxarıldı. Dokular 10% neytral tamponlu şəkildə 1 həftədir, etilenediyaMinetetetetetic turşusu və parafin ilə dekolcifikasiya edilmiş 10% neytrallaşdırılmış formalaşda sabitlənmişdir. Toxuma blokları parafin içərisinə daxil edildi və mikrotome istifadə edərək oxital bölmələrə (5 mkm qalınlığa) kəsildi. Bölmələr hematoksilin və eozin (H & E) ilə ləkələndi.
Hər qrupdakı dovşanlardan intervertebral diskləri topladıqdan sonra Cəmi RNT, istehsalçının təlimatlarına və Təcrübəsiz II Tərs Transkripsiya Sisteminə görə (Şanxay Sangon Biotexnologiyası Co, Ltd, Ltd, Çin) istifadə edərək çıxarıldı. , Madison, WI, ABŞ). Tərs transkripsiya aparıldı.
RT-QPCR, bir prizmadan istifadə edərək yerinə yetirildi (Tətbiqi Biosystems Inc., ABŞ) və Sybr Green Jump başlatma Taq Readymix (Sigma-Aldrich, Sent-Luis, Sent Louis, Mo, ABŞ) və Sybra Green Jump başlatma istifadə edərək edildi. PCR reaksiya həcmi 20 mkl, 1,5 mkl seyreltilmiş CDNA və hər bir astarın 0,2 mkm idi. Astarlar Oligoperfect Dizayner (Invitrojen, Valencia, CA) və Nanjing Golden Stewart Biotexnologiya Co, Ltd (Çin) tərəfindən istehsal edilmişdir (Cədvəl 1) tərəfindən hazırlanmışdır. Aşağıdakı termal velosiped şəraiti istifadə edildi: ilkin polimeraz aktivləşdirmə 94 ° C-də 94 ° C-də, sonra 40 dövrün 40 dövrü, şablon denaturasiyası üçün 44 ° C-də 40 dövrdə 40 ° C, uzatma və flüoresan. Ölçmələr 72 ° C-də 1 dəq üçün edildi. Bütün nümunələr üç dəfə gücləndirildi və orta dəyər RT-QPCR təhlili üçün istifadə edilmişdir. Gücləndirmə məlumatları FlexStation 3 (molekulyar cihaz, Sunnyvale, CA, ABŞ) istifadə edərək təhlil edildi. IL-4, IL-17 və IFN-γ gen ifadəsi endogen nəzarət (ACTB) ilə normallaşdı. Hədəf MRNA-nın nisbi ifadə səviyyəsi 2-δδct metodundan istifadə edərək hesablanmışdır.
Total protein, Toxuma Homogenizer (Prosiz və Fosfataza inhibitoru kokteylində bir toxuma homogenizatoru) istifadə edərək toxuma homojenizatoru) və sonra toxuma zibilini silmək üçün 4 ° C-də 13000 RPM-də 13000 RPM-də 13000 RPM-də 20 min rpm-də sentrifuged edilmişdir. Əlli mikrogram protein, 10% SDS-səhifə ilə ayrılmış və sonra bir PVDF membranına köçürüldü. Tıxanma, otaq temperaturunda 0,1% iyirmi 20 üçün 0,1% iyirmi 20 olan Tris tamponlu şoran (TBS) 5% qeyri-qanuni quru süddə edildi. Membran, Dovşan Anti-Decorin ilkin anti-Decorin ilkin antikor (seyreltilmiş 1: 200; BOSER, Wuhan, Çin) (1: 200; Bioss, Pekin, Çin), ikinci günlərdə reaksiya göstərdi və ikinci günlərdə reaksiya göstərdi; İkinci dərəcəli antikor (keçi anti-dovşan immunoglobulin g 1: 40.000 seyreltilme) horseradish peroksidaz (boster, wuhan, Çin) ilə birlikdə otaq temperaturunda 1 saat. Qərb Blot siqnalları x-ray şüalanmadan sonra Chemiluminescent Membrandakı chenmiluminescence-nin artması ilə aşkar edilmişdir. Densitometrik analiz üçün blotlar BandScan proqramından istifadə edərək skan edilmiş və miqdarda qiymətləndirilmiş və nəticələr TUBULIN immunoreactivity-ə hədəf gen immuneaktivliyinin nisbəti kimi ifadə edildi.
SPSS16.0 proqram paketi (SPSS, ABŞ) istifadə edərək statistik hesablamalar aparıldı. Tədqiqat zamanı toplanan məlumatlar orta ± standart sapma (orta ± SD) kimi ifadə edildi və iki qrup arasındakı fərqləri müəyyənləşdirmək üçün bir tərəfli təkrarlanan tədbirlərin (ANOVA) bir tərəfli təkrar tədbirlərin analizi istifadə edərək təhlil edildi. P <0.05 statistik cəhətdən əhəmiyyətli hesab edildi.
Beləliklə, MC-nin otoloji cəhətdən otoloji bədənə implanting və makroanatomik müşahidə implanting edərək, MRİ analizi, histoloji qiymətləndirmə və molekulyar bioloji analizin insan MC-nin mexanizmlərini və yeni terapevtiklərin inkişafı üçün vacib bir vasitə ola bilər müdaxilələr.
Bu məqaləni necə sitat gətirmək olar: Han, C. et al. Modoloji dəyişikliklərin bir heyvan modeli, lomber onurğanın subchondral sümüyünə otoloji nüvə pulposusunu implantasiya edərək quruldu. Sci. 6, 35102: 10.1038 / SREP35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J. və Boos, N. Maqnetik rezonans görüntüləri . dərəcəsi. Radiologiya 209, 661-666, DOI: 10.1148 / Radiologiya.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS və Leboeuf-eed, K. Modik dəyişikliklər və onların klinik tapıntıları ilə əlaqələri. Avropa Onurğa Jurnalı: Avropa Onurğa Cəmiyyətinin rəsmi nəşri, Avropa Onurğa Deformasiyasının Avropa Cəmiyyəti və Avropa Servikal Onurğa Tədqiqatları Cəmiyyəti 15, 1312-1319, DOI: 10.1007 / S00586-006-0185-X (2006).
Kuisma, M., et al. Lomber Vertebral Dönünənlərdə Modik Dəyişikliklər: Orta yaşlı kişi işçilərində bel ağrısı və skiatika ilə yayılma və birləşmə. Spine 32, 1116-1122, DOI: 10.1097 / 01.brs.0000261561.12944.FF (2007).
De Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K. və Dalinka, M. MHİ, Lomber onurğanın degenerativ xəstəliyində sümük iliyi yaxınlaşır. AJR. American Radiologiya Jurnalı 149, 531-534, DOI: 10.2214 / AJR.149.3.531 (1987).
Modik, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ və Carter, JR degenerativ disk xəstəliyi: MHİ ilə vertebral iliyin qiymətləndirilməsi. Radiologiya 166, 193-199, Doi: 10.1148 / Radiologiya.166.1.3336678 (1988) (1988).
Modik, mt, masaryk, tj, ross, js və carter, jr degeenerativ disk xəstəliyinin görüntüsü. Radiologiya 168, 177-186, DOI: 10.1148 / Radiologiya.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Ümumi əhalidə neoverebral endplate (modiki) siqnal dəyişikliklərinin proqnozlaşdırıcıları. Avropa Onurğa Jurnalı: Avropa Onurğa Cəmiyyətinin rəsmi nəşri, Avropa Onurğa Düzəltmə Cəmiyyəti və Servikal Onurğa Tədqiqatları üzrə Avropa Cəmiyyəti, 19, 129-135, DOI: 10.1007 / S00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB və Mannisch, K., Lomber Discness Yırtıqdan sonra Modic Dəyişikliklər. Avropa Onurğa Jurnalı: Avropa Onurğa Cəmiyyətinin rəsmi nəşri, Avropa Onurğa Deformasiyası və Avropa Servikal Onurğa Tədqiqatları üzrə Avropa Cəmiyyəti 16, 977-982, DOI: 10.1007 / S00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., M. və Kaapa, E. Modik tipli dəyişikliklər sürətlə mütərəqqi deformasiyasi diskin degenerasiyasını proqnozlaşdıra bilər: 1 illik perspektivli bir iş. Avropa Onurğa Jurnalı 21, 1135-1142, DOI: 10.1007 / S00586-012-2147-9 (2012).
Hu, zj, zhao, fd, fang, xq və fan, SW modiki dəyişikliklər: mümkün səbəblər və lomber disk degenerasiyasına töhfə. Tibbi hipotezlər 73, 930-932, DOI: 10.1016 / J.Mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV daxili disk yırtığı. Disk 50 ildən çox problemin yayındırılması. Bel (fila pa 1976) 11, 650-653 (1986).
Saat: Dekabr-13-2024